4.3.1 取出一次性培養(yǎng)器先檢查包裝是否無(wú)損，在無(wú)菌室內(nèi)打開(kāi)無(wú)菌包裝。 
4.3.2 將一次性培養(yǎng)器逐個(gè)插放在不銹鋼排液槽上。 
4.3.3 將一次性培養(yǎng)器的彈性軟管裝入集菌儀的蠕動(dòng)泵頭，要求定位準(zhǔn)確，軟管走勢(shì)順暢。 
4.3.4 用中間的針孔插到樣品瓶里，然后用尾端針孔插到稀釋液里，開(kāi)機(jī)，將稀釋液倒置，把液體打入樣品瓶中，樣品瓶中液體加滿(mǎn)后，放下稀釋液，再倒置樣品瓶，使樣品通過(guò)培養(yǎng)器進(jìn)行集菌。 
4.3.5 完成集菌后，開(kāi)啟已滅菌好的培養(yǎng)基瓶，將前端針頭插入培養(yǎng)基中，稀釋液瓶中針孔不要拔出。 
4.3.6 摘下一次性培養(yǎng)器頂部空氣濾器開(kāi)口的膠塞，套在一次性培養(yǎng)器的底口上， 
4.3.7 用夾子夾閉與一次性培養(yǎng)器連接部的軟管，留出5-6cm軟管，剪除其余部分，并將開(kāi)口端插在空氣濾器的開(kāi)口上。 
4.3.8 分別按照規(guī)定時(shí)間培養(yǎng)。 
4.3.9 觀(guān)察培養(yǎng)情況，若需取樣分離培養(yǎng)，可將軟管消毒，用無(wú)菌注射器插入軟管抽取所需；量做進(jìn)一步檢查 。 
4.4 微生物限度檢測(cè)操作過(guò)程 
4.4.1 取濾膜（直徑50mm）N張，浸泡在純化水里約5分鐘。 
4.4.2 用鑷子取出濾膜，平帖在不銹鋼網(wǎng)面片放入不銹鋼底座里，放入墊片和0型圈，將螺蓋和杯體蓋緊組裝成一套完整的全封閉過(guò)濾培養(yǎng)器。 
4.4.3 滅菌，用牛皮紙將組裝好的培養(yǎng)器包好，放入高壓濕熱滅菌鍋里，121℃,0.1MPa進(jìn)行滅菌。 
4.4.4 取滅菌好的培養(yǎng)器至微生物限度檢定室，進(jìn)行集菌過(guò)濾。 
4.4.5 打開(kāi)配制好的固體培養(yǎng)基，將集菌好的濾膜平帖在培養(yǎng)基上（濾膜上不可以有氣泡產(chǎn)生）。 
4.4.6 按照規(guī)定進(jìn)行培養(yǎng)。 
4.5 注意事項(xiàng) 
4.5.1 在集菌儀泵頭合上之前（需扣緊蠕動(dòng)泵東快），嚴(yán)禁啟動(dòng)開(kāi)關(guān)，否則將可能倒置手部受傷。 
4.5.2 若無(wú)菌室采用化學(xué)消毒劑消毒時(shí)，應(yīng)將儀器移至封閉罩內(nèi)，或搬出無(wú)菌室，以免損壞電子不見(jiàn)和儀器表面。 
4.5.3 應(yīng)保持取樣針上的過(guò)濾膜干燥，氣流暢通，正常進(jìn)液。方法是在取樣針插入瓶裝流體樣品時(shí)，應(yīng)先開(kāi)機(jī)，然后倒置容器瓶。 
4.5.4 若敬業(yè)管內(nèi)出現(xiàn)過(guò)多氣泡，應(yīng)將泵速降低，并檢查進(jìn)氣濾膜是否被浸泡，若不能進(jìn)液，則檢查進(jìn)液針是否暢通。